Cbl-b蛋白是一类E3 泛素蛋白连接酶，负向调节免疫功能，极有希望成为一种新型细胞内免疫检查点药物靶点。

青云瑞晶已完成Cbl-b靶点蛋白的表达和结构解析。基于这些实验条件和库存蛋白，青云瑞晶将项目项目的交付时间缩短至1-2个月，并确保项目的成功交付。

Cbl-b全名Casitas B lymphoma-b（Uniprot ID Q13191），是一种RING-type E3泛素蛋白连接酶，属于CBL家族的成员，在人类中由CBLB基因编码。E3 泛素蛋白连接酶，从特定的E2泛素结合酶中接受泛素，并将其转移到底物上，从而促进蛋白酶体对底物的降解。

Cbl-b蛋白全长982个氨基酸，由不同的结构域组成，包含高度保守的磷酸酪氨酸激酶结合结构域(TKB)、连接结构域(LH)、环指结构域(RING)和C端的富脯氨酸结构域(PRR)、泛素结合结构域（UBA）。其中TKB结构域包含四螺旋束（4H）序列、Ca2+结合EF-hand序列、SH2序列共三个亚结构域，并通过连接子（LHR）与RING锌指结构域相连，TKB、LHR、RING三个结构域共同行使E3连接酶催化活性并通过其TKB结构域靶向磷酸化酪氨酸激酶（包括生长因子受体和细胞因子受体）以及非受体酪氨酸激酶。

Cbl-b不同构域之间构象变化会导致蛋白呈现封闭的非活性（inactive）构象或者开放的活性（active）构象。LH被夹在TKB结构域上，限制了RING结构域的运动，使其要么处于封闭和自动抑制状态，要么处于开放状态并能与E2结合。保守的酪氨酸（Tyr363，标记为Tyr）被磷酸化后(PTyr)，LH从TKB中释放，RING结构域翻转180度，移至底物附近，Cbl-b从自抑制的封闭状态转变为有活性的开放状态。针对Cbl-b靶点设计的抑制剂小分子一般结合在非活性构象的TKB结构域和LHR结构域之间，将蛋白稳定在非活性封闭构象，类似于SHP2变构抑制剂的机理。

Kimani S, Perveen S, Szewczyk M, et al. Probing the mechanism of Cbl-b inhibition by a small-molecule inhibitor[J]. bioRxiv, 2023: 2023.05. 05.539612.

Cbl-b可负向调节TCR（T细胞受体）、BCR（B细胞受体）和FCER1（高亲和力免疫球蛋白ε受体）信号转导途径；同时，在受体酪氨酸激酶（RTKs）的内吞和溶酶体降解等负向调控过程中，c-Cbl和Cbl-b蛋白作为泛素连接酶和内吞接头分子也发挥了关键作用。Cbl-b在T细胞中的表达会导致配体诱导的T细胞受体下调，从而控制T细胞在抗原递呈过程中的活化程度。因此泛素连接酶Cbl-b在细胞中高表达可降低免疫细胞对靶细胞的识别和杀伤活性。Cbl-b在一些肿瘤细胞中高表达，比如黑素瘤组织、胃癌组织，高表达的Cbl-b能够帮助这些肿瘤细胞免疫逃逸，且与胃癌的侵袭及淋巴结转移相关。因此抑制Cbl-b活性可增强抗肿瘤免疫效应，如同另一免疫靶点PD-1一样。

癌症免疫疗法（Cancer immunotherapy，CI）是依靠激活患者自身的免疫细胞来对抗肿瘤，在过去十年中彻底改变了肿瘤治疗模式。然而，即使在肺癌领域，许多最成功的免疫检查点阻断疗法已获得批准，但只有一部分（25-30%）患者对此类药物有反应并从中获益。因此，迫切需要更多的CI药物来帮助更多的癌症患者。Cbl-b作为一种重要的免疫调控靶点，在肿瘤的免疫治疗领域越来越多的成为抗肿瘤药物的设计靶点，展现出了越来越大的前景。

因此解析Cbl-b不同活性状态的结构对于开发相关靶点药物具有重要意义。

青云瑞晶针对Cbl-b蛋白完成了38-427（包含TKB、LHR、RING三给结构域）片段的表达、纯化和结晶，针对该靶点及其抑制剂的共晶结构也累积了丰富的数据。同时储备了Cbl-b通路上下游相关靶点蛋白的表达、纯化和结晶经验，可将项目项目的交付时间缩短至1-2个月，并确保项目的成功交付，满足企业药物研发需求。

表达纯化结果周期：现货/定制约1周

结晶和结构解析周期：2-4 周