撰文：Dr韦

本文审核专家：江苏大学附属医院 李晶教授

引言

最近研究显示，冷冻储存超过27年的干细胞仍然保留原有的免疫表型及功能性，具有移植治疗的潜力。这些数据为细胞长期冷冻存储后的应用提供了坚实的数据基础。然而，干细胞存储时间的长短与存储技术、设备的先进性、细胞的初始质量以及存储机构的专业水平等因素密切相关。因此，人们在做抉择时，不仅要做好干细胞知识的充分备课，还要充分考虑干细胞存储机构的服务能力。

干细胞存储起始于20世纪90年代，从脐带和胎盘等新生儿围产组织到脂肪等成体组织，储存的所有来源干细胞不仅用于研究，还通常被用于临床应用，包括移植和再生医学。

冷冻保存是最为常见的干细胞储存方式，成为目前的黄金标准。通过冷冻技术而长期存储细胞，为后续的科学研究、疾病治疗等提供资源。

2023年的研究显示，冷冻储存超过27年的干细胞仍然保留原有的免疫表型及功能性，具有移植治疗的潜力[1]。这些数据为细胞冷冻存储后的应用提供了坚实的数据基础。

图片来自文献[1]

用冷冻27年的胚胎，生出健康的宝宝

根据美国CNN电台报道，4年前，一位“特殊”的宝宝在美国田纳西州降临人世，她是冷冻27年的胚胎“解冻唤醒后”而生的，打破了目前已诞生的胚胎冷冻时间的最长纪录[2]。

这位“特殊”的宝宝名为莫莉.吉布森。孕育她的胚胎于1992年10月被冷冻，一直到2020年2月初，她的父母蒂娜和本.吉布森接受了这个胚胎，并由国家胚胎捐献中心实验室主任兼胚胎学家卡罗尔·萨默费尔特解冻，然后由专业团队将胚胎植入到蒂娜的子宫中。在足月后，蒂娜成功诞下了莫莉。

莫莉的出生创造了一项新记录。据记载，她的姐姐艾玛曾经是最长的冷冻人类胚胎成功分娩的纪录保持者。事实上，莫莉与姐姐艾玛的胚胎是在1992年同一天被冷冻的，只是姐姐艾玛的胚胎在2017年3月被解冻后移植到妈妈蒂娜的子宫内，并与2017年11月25日出生。她的胚胎经历了24年的冷冻。

文献证明：

冷冻保存20年以上的干细胞仍具有强大的分化潜能

艾玛和莫莉的诞生，显示出了科技的进步，同时也让人们对冷冻技术有了更加深刻的认识。随着数据的积累，越来越多的文献披露了干细胞冷冻存储20-30年仍然具有功能和活性。

一项研究[2]将已经冷冻保存23-25年的人细胞样本解冻后扩增繁殖以获得间充质干细胞，并以新鲜采集的人细胞样本作为对照，比较二者的恢复效率和生长特性以及分化潜能。

结果表明，二者间充质干细胞在体外分化为成骨细胞、脂肪细胞和神经元细胞的能力相似。证实即便经过长期（23-25年）冷冻保存，仍可以获得具有良好分化能力的间充质干细胞。

在这项研究中，研究人员评估长期冷冻保存的间充质干细胞（MSCs）的活力及分化潜能。结果发现：

（1）尽管长期冷冻保存和解冻后部分细胞被损坏，但经过培养仍然可以获得适量的贴壁健康细胞。

（2） 可以从长期冷冻保存的原代培养物中获取到间充质干细胞。

比如，在研究中，3天后冻存组和对照组均可见小棱柱贴壁细胞，培养10天后数量增多。第 14 天时，两组贴壁细胞均呈现螺旋状生长。14天后，冷冻组和对照组中成纤维细胞样细胞的百分比分别为88.2±4.3%和89.1±3.8%（p>0.05）。当根据存活细胞数量计算时，两组都具有相似的增殖能力。通过测定了MSCs常见分子标记的表达，表明上述成纤维细胞样细胞确实是MSCs。

（3）长期冷冻保存间充质干细胞仍具有强大分化潜能：结果表明，冻存组和对照组获得的P3培养物分化成成骨细胞、脂肪细胞和神经元细胞的能力没有显着差异，表明长期冻存和解冻并未损害间充质干细胞的分化潜力。

国内学者发表的研究表明[4]，经过液氮长期冻存，复苏后的胎盘间充质干细胞的活性未受明显的影响，复苏后的间充质干细胞仍然保持着生物学特性，可以进行扩增、传代培养等，具有成骨、成脂的多向分化潜能。

干细胞能存储多久？这跟存储机构有很大的关系

干细胞存储是将干细胞从不同的人体组织中分离、培养以及检测鉴定后，再冻存于-196℃的深冷低温中，以便于在临床需要时可以将干细胞复苏用于治疗疾病。

干细胞存储时间的长短与存储技术、设备的先进性、细胞的初始质量以及存储机构的专业水平等因素密切相关。比如，一些先进的液氮存储设备能够提供更稳定的低温环境，有助于延长细胞的存储寿命。同时，在存储前对细胞进行严格的质量检测和处理，也能提高细胞在长期存储后的可用性。

因此，选择一家专业的权威的细胞库对于细胞存储用户而言至关重要。用户在做决定时除了做好干细胞知识的充分备课，还要充分考虑干细胞存储机构的服务能力，综合考虑多种因素，包括：质量管理体系、资质认证、实验室人员的配置、实验室环境、样本的运输条件、实验室配套设备水平、高效的细胞处理技术、以及临床研发能力等。

质量管理体系：

质量管理体系对于细胞库的正常运行、质量保障、合规性以及长期发展都具有至关重要的意义。

首先，具有高质量管理体系的细胞存储机构能够制定严格的细胞存储流程，包括细胞采集、处理、储存和分发的标准操作流程（SOP），从而保证细胞的质量稳定和一致性。

其次，质量管理体系要求对细胞库中的每一个细胞样本都进行详细的记录和标识，包括来源、处理过程、储存位置和使用情况等信息，实现了细胞样本的全程可追溯。

博雅拥有一套完整的质量管理体系，拥有同时通过国际AABB、澳大利亚NRL、和美国病理学会CAP三大国际认证及实验室能力检测，在国内通过中检院的鉴定，保障存储和制备的细胞达到药品级别。

及资质认证：

血液与生物治疗促进协会(the Association for the Advancement of Blood & Biotherapies，AABB)成立于1947年，是一个国际性非营利性协会，是输血医学和生物疗法质量体系标准认定、认证和实施的全球领导者。

通过AABB认证，则意味着储存机构在细胞处理、储存及发放方面均达到国际标准，存储在这个细胞库中的细胞取得“国际认证”。

作为目前国际上干细胞库最权威认证，血液与生物治疗促进协会要求定期对拥有AABB认证的干细胞库进行复审，然后重新颁发证书。这意味着，通过AABB认证的干细胞库不仅仅是设备、服务、安全、基础设施、质量最“过硬”的机构，这种质量还拥有持续的保障。

博雅早在2012年，就率先获得了AABB认证，而后的12年间，既保障每2年一次的复审，又不断扩展细胞认证的种类与范围。AABB认证资质可以作为储户做选择时的“放心型”参考指标。

设备以及制备技术：用于收集和处理样品的实验室耗材以及设备必须符合质量标准。一般情况下，实验室耗材以及设备符合全球标准的存储机构才能通过AABB资质认证。

博雅为每个家庭的细胞样本设置“专线”呵护，全流程专利技术，护航细胞质量。

博雅“专线”呵护

（1）样本运输：样本全流程专利冷链温控系统：BACCS®。

博雅在运输全程采用冷链系统，将温度稳定在2-24℃，在此温度下，干细胞的活性能保证最大化不受影响。同时，为了监控温度的变化，博雅采用自主研发的专利温度监控系统——BACCS®系统，监控运输全程温度的变化。BACCS®系统可监控精确至0.1℃的温度变化；

（2）样本识别：ISBT128全球唯一身份识别系统发放“全球护照”；

（3）样本检测：独立检测能力，每份样本接受严格的病原及微生物检测；

（4）样本制备：制备过程应用22项专利，及自动化细胞分离系统；

（5）样本存储：自动化样本存储，多重保险，确保样本库安全稳定。

临床研发能力：临床研发能力是衡量干细胞存储机构实力的关键因素之一，直接影响着机构的技术水平、服务质量和行业地位。博雅生命广泛布局了干细胞药物、免疫细胞药物、细胞医疗技术以及细胞衍生产品研发，并获得多项重要进展。目前，博雅拥有通过IND的细胞药物研发管线，共有近20项细胞医疗技术、细胞药物研发管线在同步推进，涉及骨科、妇科、自身免疫系统等多个重大疾病领域，同时在抗衰领域进行了长足的探讨。

△博雅生命被评为“干细胞&外泌体新药研发启明星”

机构的品牌影响力：强大的品牌影响力意味着细胞存储机构在市场上具有较高的知名度和认可度。比如，一些大型、知名的细胞库能够吸引到顶尖的科研人才和投入更多的研发资金，从而不断提升自身的技术水平和服务质量。而且，品牌影响力大的细胞库在与医疗机构、科研单位合作时也更具优势，能够为客户提供更多的增值服务和合作机会。

△博雅生命入选“星耀榜-CGT领域年度最具成长性企业”

自2009年成立至今，博雅生命在技术和服务上不断突破并获得广泛的认可，先后收获“CCTV中国年度品牌”，“高新技术企业”，“中国健康新势力企业”等行业殊荣，2022年受聘成为“中国干细胞产业联盟”第一届副理事长”。今年，博雅生命的品牌影响力持续扩大，获得了“2024年干细胞和外泌体新药启明星”、“2024最具影响力企业”、“2024最佳创新药企业”、“星耀榜-CGT领域年度最具成长性企业”4项殊荣。

参考文献：

[1] https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2666379123004366

[2]https://edition.cnn.com/2020/12/01/us/baby-frozen-embryo-27-years-trnd/index.html

[3] Shen JL, Huang YZ, Xu SX, Zheng PH, Yin WJ, Cen J, Gong LZ. Effectiveness of human mesenchymal stem cells derived from bone marrow cryopreserved for 23-25 years. Cryobiology. 2012 Jun;64(3):167-75. doi: 10.1016/j.cryobiol.2012.01.004. Epub 2012 Jan 18. PMID: 22280954.

[4] 低温冻存对人胎盘间充质干细胞生物学特性的影响, 中西医结合心脑血管病杂志２2013年6月第11卷第6期