很多人都遇到一个问题是：细胞冻存的时候用状态很好的细胞冻的，但是复苏却复苏不起来，细胞死掉了这种情况，这其实和冻存手法，复苏细胞手法有很大的关系。 ⚠️关于如何冻存细胞之前已发过笔记，大家可以自行翻阅，今天分享的是复苏细胞需要注意哪些问题。 ✅正确复苏细胞手法： 1、复苏细胞的时候最好加个袋子，或者用飘子卡住冻存管进行复苏（如图所示），这样可以一定程度上保证细胞不污染。 2、不要直接把冻存管丢进水浴锅！！！这样容易污染！ 3、37度水浴锅复苏，缓冻速溶法则。 4、往干净的离心管里加2～3ml培养基作为环境，再把细胞复苏后的液体加进去，这样缓冲一下，对细胞好。 5、刚复苏的细胞一定要低转速离心！400～500rpm都可，可以一定程度上去除掉因为冻存而死掉的细胞，使其更干净。 6、新复苏的细胞先不要加双抗！不要加双抗！不要加双抗！之后养起来看情况再加！ 10%血清浓度，🧫培养基用的gibco，胎牛血清用的和元李记生物的特级胎牛血清。 之前胎牛血清我们组依科赛，普诺赛，全式金都用过，仅适用于部分细胞，一些比较难养的悬浮细胞使用感受并不好，gibco血清是可以养的不错但是奈何经费有限…[笑哭R] 最近新入了和元李记生物的特级胎牛血清，我之前很难养的一株悬浮细胞竟然长势特别好，真的让我很惊喜。[萌萌哒R] 如果大家的操作手法都没问题但依旧养不好的话，可以考虑换一个pai子的血清试试看，和元李记的特级胎牛血清我用着还不错。👍 👾个人使用感受： 之前使用的那些血清尤其是依科赛，养出来的悬浮细胞变形严重，本该是很圆润的细胞，养一段时间慢慢就伸触角，毛毛躁躁，做流式还分群。 换了和元李记血清，没有这种现象了，细胞一直都很圆润，并且长势飞快～我还检测了一下贴壁细胞的培养效果，细胞长势也是很好的。 除此之外，同时用gibco血清与和元李记血清培养同一株悬浮细胞看差别，二者长势类似，都没有变形情况。 🧫🧫🧫🧫经费有预算的宝子们真的可以尝试下和元李记家的血清，个人感觉是喜欢的。[派对R]