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⚠️细胞转染protocol和tips(提高转染效率

细胞转染分为四种,脂质体,PEI,电转,病毒转染。 🍀脂质体转染 这是目前实验室最方便的转染方法之一,其转染效率较高,一般常用的脂质体转染试剂是lipo2000或lip03000,但是对细胞毒性有点大,不适用于一些做细胞死亡的课题。 🍀电穿孔转染 这种方法细胞的死亡率较高,且易污染,不推荐。 🍀病毒感染 一般用于悬浮细胞瞬时转染或者构建稳株,一些脂质体转染效果不好的贴壁细胞也可用病毒感染法。 🔝如何提高转染效率? 1、细胞在70%的时候就转染,细胞密度太高的话转染效果不好。 2、选择状态很好的细胞去转染,蛋白表达会更好,且转染至少36h。 3、转染前可饥饿处理几小时,转染效率可变高,但是这样有细胞状态变差的风险,只适用于部分蛋白的转染。 4、可采用专门的转染前培养基,从而提高细胞转染效率。 🍀⚠️个人最近在试用一款新的培养基,转染前专用,可以提高转染效率,是:XR-PTM。 他们家这个转染前培养基是特别优化过的,富含脂质,胰岛素,微量元素,维生素,转铁蛋白等等,主要就是用于细胞转染前使用,可明显提高转染效率~增强蛋白表达,在转染前短时间培养几小时即可。 🏋️本人做了一个小测试,做了两组转染。 一组未使用XR-PTM,一组使用XR-PTM养细胞,然后同时转染一样的质粒,36h收细胞检测蛋白表达,发现使用了XR-PTM的细胞组蛋白表达高了3~4倍,这个效果真的很惊喜!!🥹(图3)准备去找老板商量再搞一些了[哭惹R][哭惹R][哭惹R] 尊滴不错👍,推荐给有需要的宝宝。[自拍R]