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📈细胞转染protocol和tips(提高转染效率)

好多宝问我核酸转染相关的问题,sirna,mrna,质粒等…protocol在图2。🌱 细胞转染常用的就是lipo,PEI,电转,病毒感染,but后起之秀:纳米脂质体也用来越多人用了,很多文献也有报道✅ 🍀脂质体/PEI转染 这是目前实验室比较常用的,转染效率较高,但也有缺点: 1、lipo对细胞毒性有点大,部分细胞也转不进去,且不适用和细胞死亡相关课题。 2、有研究表明lipo本身会改变细胞的生物学功能,引起部分蛋白上下调。 3、PEI虽然毒性低,但是实体细胞转染效果很差,基本只用来转染工具细胞。 🍀电穿孔转染 这种方法细胞的死亡率较高,易污染,不推荐。 🍀病毒感染 一般用于悬浮细胞,一些脂质体转染效果不好的贴壁细胞也用,感染效果不算稳定,如果自己做也比较复杂。 🍀纳米脂质体转染(⏫近些年剑桥大牛团队研发的新型转染试剂) 转染与递送 rna 二合一,可用于多类型的真核细胞实验,优势: 1️⃣综合了lipo和PEI二者的优点,既毒性低,转染效率又好。 2️⃣‼️主要亮点:可直接用于动物实验,进行💊递送等,且已在体内动物多次验证效果‼️ 3️⃣转染与递送 rna 二合一。 4️⃣可做细胞死亡相关课题,基本不影响细胞状态和生物huo性。 5️⃣可转悬浮细胞,lipo转不进去然而又不想包病毒可以试试纳米脂质体转染。 🔝如何提高转染效率❓ ✅1、百分之70的时候就转染,细胞密度别太高。 ✅2、选择状态很好的细胞去做,蛋白表达会更好,且转染至少36h。 ✅3、转染前或者转染期间可饥饿处理4~6小时,转染效率可变高! ✅4、可尝试使用纳米脂质体转染试剂,近些年的后起之秀,转染效果不比lipo差,且基本无毒性,zui主要的是可以直接进行体内动物实验,且好多文献已经有报道相关动物实验的数据资料~图578有介绍。 🍀⚠️个人近期在试用的:关山纳米脂质体,效果还可以~👍目前只在细胞层面做过,结果如图6,动物我还没试过hhh,之后做动物实验的话打算试一下![哇R] 他们有试用装,有需要的崽可以去dd试用一下看看转染效果~[喝奶茶R]

评论列表

豆花
豆花 2
2024-06-26 00:58
哇 博主主页好多实验干货,关注了
切草哥
切草哥 1
2024-06-26 01:23
小白鼠嘛