如何提升细胞的转染效率呢 [一R]选择合适的细胞类型：首先对于慢病毒的转染我们要选择好合适的细胞系，如HEK293或COS-7细胞； [二R]细胞活性： 1）为获得良好的转染效率，建议使用活性超过90%的细胞，密度在70%-90%左右，可以通过台盼蓝染色测定细胞活性。 2）不建议使用传代次数超过15次的细胞进行实验。 3）新复苏的细胞在转染实验前需传代2-3次，待细胞恢复正常生长后使用。 [三R]血清和抗生素：​在转染过程中，尽量避免使用血清和抗生素，因为它们可能会影响转染效率。但现在市面上的一些转染试剂没有要求一定要用无血清的培养基，具体情况还是要根据实际转染试剂决定。 [四R]使用辅助技术：使用电穿孔、核糖体，蛋白纳米颗粒等物理或化学方法辅助转染（P3P4）。 [五R]优化转染时间：确定最佳的转染时间，因为过长或过短的转染时间都可能影响效率。对于脂质体而言，通常在转染后6-8h进行换液； [六R]质粒DNA能否用于原代细胞转染 双链DNA转染原代细胞可能引起一定的毒性，例如炎症应激，因此需根据实验目的谨慎选择。以人或小鼠来源的原代T细胞为例，使用质粒DNA转染可能导致显著的细胞毒性，因此不适合此类细胞。而大多细胞系通常经过多代培养，能更有效地应对外源DNA带来的压力，对双链DNA转染的耐受性较高，因此可以使用质粒DNA进行转染。 需要转染人或者鼠的原代T细胞的话，可以用[向右R]西湖凝聚体研发的蛋白递送的转染试剂ProteanFect，转mRNA来过表达，转siRNA来敲除.因为是基于内源蛋白纳米颗粒转染的所以刺激性小，细胞活率高。 [七R]质粒DNA转染要求 转染效率受DNA质量影响。建议使用无内毒素试剂盒制备DNA，并确保OD值在1.7-1.9之间；使用无核酸酶纯水将DNA稀释至0.5-2 μg/μL的浓度。