设计qPCR,RT-PCR,CRISPER-Cas9 序列，构plasmid等等这些序列的时候，能不照搬文献里的就不要照搬文献里的，因为真的大概率p不出来做不成功，也不能说文献里是错的，反正大概率就是做不出来，就是玄学，做过科研的懂得都懂，别说序列了文献里的结果重复都重复不出。
能靠自己就靠自己设计primer，我前段时间因为偷懒照搬了几个文献里的primer，我总共订了60对，就文献里那几对没p出来哈哈哈哈。
同学之间也有过类似情况，照搬文献里的sg序列构建plasmid，完全敲不掉，反而自己设计的敲掉了。
所以不要偷懒照搬，不然真的大概率浪费时间[黄金薯R]
文献我们参考他们的idea，学新知识新思路思维等等就好了，方法学还有别的一些感觉很多文献写的并不清楚，除了一些CNS级别的或者别的顶刊的文献，但自己做的东西很多都是没有发过CNS相关的文章，甚至都没有什么人研究过的，文献的参考价值真的太参差不齐了。