日本731部队的主要手段有：1·用活人试验氢酸化合物的最低致死量。2·因入侵我国东北的日军有不少冻伤，于是将中国人冻伤后，研究冻伤原理、治疗，细菌感染、最适温度等。3·让活人吸入大量的烟、瓦斯，观察肺的变化。4·将活人炸伤，强制其伤口感染坏疽病菌，观察并详细记录其由发病到死亡的过程。5·将活人用手枪、手榴弹或角钝器击伤，观察伤口，制作标本。6·将活人关入装甲车，引燃一千度以上的高热火焰，以试验陆军发明的燃烧剂和火焰放射器，受害者均被活活烧焦。7·用活人试验三八式步枪的穿透性能，看同时可击穿几人，及距离、穿防寒服与否等的人数。8·解剖活人甚至孕妇，“采集标本”。9·在活人静脉内注入空气，观察其身体各部器官变化及死亡的过程。