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东北农业大学使用RFectSP悬浮细胞siRNA转染试剂成功转染鸡外周血淋巴细胞

东北农业大学研究人员利用RFectSP悬浮细胞siRNA转染试剂,成功实现了对鸡外周血淋巴细胞的siRNA、miRNA转

东北农业大学研究人员利用RFectSP悬浮细胞siRNA转染试剂,成功实现了对鸡外周血淋巴细胞的siRNA、miRNA转染!

鸡外周血淋巴细胞是家禽免疫与疫病机制研究中常用的细胞模型之一。但这类细胞体外存活条件苛刻、细胞状态脆弱,对转染试剂的毒性高度敏感,极易引发细胞失活、裂解死亡,再加上淋巴细胞细胞膜结构致密、固有胞吞活性极低,对外源核酸的摄取能力极差,常规转染方法递送效率极低,向来被视作转染难度极高的细胞类型。

东北农业大学研究者在尝试过多款转染试剂后,最终使用RFectSP悬浮细胞siRNA转染试剂成功将miR-6615-5p模拟物mimics、miR-6615-5p抑制物inhibitor和SMAD7抑制物siRNA转染进入鸡外周血淋巴细胞中!经RT-qPCR检测发现,转染后,与空白对照组相比,当过表达模拟物mimic时,miR-6615-5p的mRNA水平显著增加了1803.20倍;当转染抑制物inhibitor时,miR-6615-5p的mRNA水平显著降低了98.10%;当转染SMAD7抑制物siRNA时,SMAD7的mRNA表达量显著降低了98.52%!

相关文献:氨气暴露诱导鸡外周血淋巴细胞免疫抑制和细胞凋亡的机理研究