山东中医药大学研究人员使用BIOG miRNA茎环法逆转录试剂盒对目的基因miR-375成功进行了逆转录!
miRNA逆转录的难点在于其分子较小,逆转录引物无法理想地与其结合。要进行miRNA逆转录,就需要对miRNA分子进行加长改造。有2种方法可达至这一目的。一种采取Poly(A)加尾法,另一种采用茎环法进行加长。对于只检测1-2个miRNA的研究者来说,选用茎环法比较合适,因为茎环法逆转录结果更加特异。其成功的关键在于茎环的设计,该茎环应能高效地与miRNA 3’端特异、高效地结合,同时还要能够顺利地折叠和打开。
山东中医药大学研究者在尝试过多款逆转录试剂盒后,最终使用BIOG miRNA茎环法逆转录试剂成功对目的基因miR-375进行了逆转录,并通过BIOG miRNA茎环染料法荧光定量PCR试剂盒顺利进行了miR-375的qRT-PCR检测,成功验证了miR-375已成功转染进细胞!
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