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南昌大学使用RFectPM原代细胞siRNA/miRNA转染试剂成功转染大鼠原代膀胱成纤维细胞

南昌大学研究人员利用RFectPM原代细胞siRNA/miRNA转染试剂,成功实现了对大鼠原代膀胱成纤维细胞的miRNA

南昌大学研究人员利用RFectPM原代细胞siRNA/miRNA转染试剂,成功实现了对大鼠原代膀胱成纤维细胞的miRNA转染!

大鼠原代膀胱成纤维细胞是泌尿组织研究中常用的原代细胞模型之一。但这类细胞体外耐受度低,对外界刺激反应强烈,对转染试剂毒性敏感度高,易出现形态异常与凋亡损伤;再者,细胞结构紧实、物质胞吞转运效率偏低,外源基因不易顺利导入胞内,因此,被认为是转染难度较大的细胞类型。

南昌大学研究者在几经摸索后,最终使用RFectPM原代细胞siRNA/miRNA转染试剂成功将miRNA-21NC(阴性对照组)、miRNA-21Agomir(miRNA-21激动剂)、Antagomir(miRNA-21抑制剂)转染进入大鼠原代膀胱成纤维细胞中!经RT-qPCR检测发现,转染miRNA-21 Agomir后,与NC相比,miRNA-21表达水平显著上调,smad7 mRNA和蛋白水平的表达被显著抑制,Collal mRNA和蛋白水平的表达被促进。然而在转染miRNA-21 Antagomir后,miRNA-21表达被抑制,smad7表达上调,Collal表达降低,证明了miRNA-21与smad7表达呈负相关!

相关文献:miRNA-21在大鼠膀胱出口部分梗阻中的作用及机制研究